每支移液器的液程通常都用純水和正向移液技術(shù)校準(zhǔn)過。因此我們推薦使用正向移液技術(shù)移取水性溶液，如緩沖液，稀釋酸或堿。當(dāng)移取不同于水的液體時(shí)，由于具有不同的液體特性，其移液量可能偏離所選的量
下面先介紹一下正向移液和反向移液技術(shù)的操作。
1.將按鈕壓至*停點(diǎn)。
2.將吸頭浸入液面下1cm處，緩慢釋放按鈕使其滑回原位。將吸頭從液體中移出，接觸容器邊緣除去多余的液體。
3.排液時(shí)，吸頭緊貼容器壁先輕按按鈕至*停點(diǎn)，略作停頓后，將按鈕按至第二停點(diǎn)（這個(gè)操作會(huì)將吸頭內(nèi)的液體*排盡），將吸頭從容器中沿容器壁移出。
4.松開按鈕至準(zhǔn)備位置。
1.將按鈕壓至第二停點(diǎn)。
2.將吸頭浸入液面1cm處，緩慢釋放按鈕使其滑回原位。這將時(shí)液體充滿吸頭。將吸頭從液體中取出，接觸容器邊緣去掉多余液體。
3.放液到接收容器時(shí)平穩(wěn)地輕按按鈕至*停點(diǎn)。保持在這個(gè)位置。一些液體會(huì)殘留在吸頭中不能被放出。
4.殘留在吸頭內(nèi)的液體能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟棄。
5.松開按鈕到準(zhǔn)備位置。
選擇合適的移液器對(duì)于微量移液的性也很重要，Thermo Scientific F系列移液器的*吹出設(shè)計(jì)則滿足了微量移液對(duì)性的需求。低于50μl液程的Thermo F系列移液器均采用雙活塞設(shè)計(jì)，與其它普通移液器相比，其空氣吹出能力增大50%-60%，因此在小體積的液體吹出時(shí)會(huì)非常干凈*，大大提高了移液的性。
我們使用Thermo Scientific Finnpipette F2 1-10 μl移液器，配合Thermo Scientific Finntip Flex 10吸頭，同時(shí)分別使用正向移液和反向移液，移取1%牛血清白蛋白（BSA，Sigma A7030）進(jìn)行移液性測(cè)試。
圖1 表明當(dāng)使用反向移液技術(shù)時(shí)，移液量的變化比使用正向移液技術(shù)處于更狹窄的一個(gè)范圍。
圖2 表明使用兩種移液方式的不度。不度是估量移液的重復(fù)性的。反向移液技術(shù)可以使不度相對(duì)于正向移液技術(shù)降低50%。
這是因?yàn)?，BSA溶液含有易被疏水移液器吸頭壁吸附的疏水成分。當(dāng)使用正向移液技術(shù)時(shí)，每次移液后少量的液體易殘留在吸頭中。這種趨勢(shì)會(huì)增加吹出液體體積之間的偏差，因?yàn)楫?dāng)重復(fù)移液時(shí)吸頭中累積的殘余液體可能增加下一次移液的移液量。而反向移液技術(shù)中有額外的液體被吸入吸頭中，這些額外的液體作用似一個(gè)蓄水池它使連續(xù)移液的移液量均等。這個(gè)蓄水池也能阻止空氣在吹出液體的zui后從吸頭口進(jìn)入，這樣可以降低液體起泡的可能性。這使反向移液技術(shù)在移取小液量液體時(shí)尤其有用。由此可見，選擇Thermo Scientific F2移液器，同時(shí)配合反向移液技術(shù)，可較好的提高移取蛋白溶液的度和重復(fù)性。
來源：離心機(jī)
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